一文讀懂白細(xì)胞散點(diǎn)圖
現(xiàn)在很多全血細(xì)胞分析儀都帶有WBC散點(diǎn)圖,散點(diǎn)圖可以為我們提供很多有用的信息,想必很多朋友都對(duì)全血細(xì)胞分析中的WBC散點(diǎn)圖頭疼過。
現(xiàn)在很多全血細(xì)胞分析儀都帶有WBC散點(diǎn)圖,散點(diǎn)圖可以為我們提供很多有用的信息,想必很多朋友都對(duì)全血細(xì)胞分析中的WBC散點(diǎn)圖頭疼過,這里我們就簡(jiǎn)要的為大家分析一下(以sysmex XN-1000儀器為例):
什么是WBC散點(diǎn)圖
運(yùn)用流式細(xì)胞計(jì)數(shù)法和其它生物粒子的物理和化學(xué)性質(zhì)進(jìn)行檢測(cè)。血液標(biāo)本經(jīng)吸取稀釋后,進(jìn)行化學(xué)染色,血細(xì)胞在鞘流內(nèi)的試劑包裹下排成一行通過檢測(cè)小孔,并有半導(dǎo)體激光束照射到血細(xì)胞上。當(dāng)血細(xì)胞經(jīng)過激光通路時(shí),光束在每個(gè)血細(xì)胞的不同方向上產(chǎn)生光散射,通過檢測(cè)散射光,將光信號(hào)轉(zhuǎn)化為電脈沖,可以得到有關(guān)細(xì)胞體積大小和材質(zhì)的信息,進(jìn)而描畫出二維的散點(diǎn)圖。
WBC散點(diǎn)圖怎么看
當(dāng)一束激光照射到血細(xì)胞顆粒上時(shí),產(chǎn)生光散射,散射光的強(qiáng)度取決于諸如顆粒直徑和觀察角度等因素。本儀器對(duì)前向散射光(FSC)進(jìn)行檢測(cè),提供有關(guān)血液細(xì)胞體積大小的信息;同時(shí)對(duì)側(cè)向散射光(SCC)進(jìn)行檢測(cè),提供細(xì)胞內(nèi)部(如細(xì)胞核、顆粒)的信息。
當(dāng)光照射到經(jīng)過熒光染色的血細(xì)胞等的熒光材料上時(shí),就會(huì)產(chǎn)生比入射光波長(zhǎng)更長(zhǎng)的光。隨著染液濃度的增加,熒光強(qiáng)度也隨之增長(zhǎng)。通過測(cè)量熒光強(qiáng)度,可以得到有關(guān)血細(xì)胞染色程度的信息。熒光向所有方向散射,本儀器檢測(cè)側(cè)向熒光(SFL)
圖1. 白細(xì)胞散點(diǎn)圖
橫坐標(biāo):SSC軸,代表側(cè)向散射光的信號(hào)強(qiáng)度
縱坐標(biāo):SFL軸,代表側(cè)向熒光的信號(hào)強(qiáng)度
散點(diǎn)圖中,利用側(cè)向散射光SSC和熒光SFL將白細(xì)胞分成五類:中性粒細(xì)胞、單核細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、嗜酸性粒細(xì)胞、嗜堿性粒細(xì)胞。
側(cè)向散射光SSC通常反映了細(xì)胞內(nèi)部顆粒結(jié)構(gòu)的復(fù)雜程度。例如,嗜酸性粒細(xì)胞由于內(nèi)部顆粒特征明顯,其側(cè)向散射光(SSC)信號(hào)強(qiáng),落在散點(diǎn)圖的右方。
由于熒光染料通常和細(xì)胞中的DNA/RNA核酸結(jié)合,所以側(cè)向熒光信號(hào)SFL通常反映了核酸的含量的多少,反映了細(xì)胞發(fā)育的成熟程度。占白細(xì)胞大比例的粒細(xì)胞完整的生長(zhǎng)要?dú)v經(jīng)原粒細(xì)胞、早幼粒細(xì)胞、中幼粒細(xì)胞、晚幼粒細(xì)胞進(jìn)而分化為成熟的桿狀核和分葉核粒細(xì)胞。在粒細(xì)胞的成熟過程中,其細(xì)胞中的核酸含量逐步減少。
由于嗜堿性粒細(xì)胞的比例很小,而且通常和中性粒細(xì)胞混在一起,很難區(qū)分。通常采用另外一個(gè)專用的通道(WNR通道)進(jìn)行檢測(cè)。所以五分類通道(WDF通道)通常提供白細(xì)胞的四種分類(中性、單核、淋巴、嗜酸)。
圖2. 嗜堿性粒細(xì)胞散點(diǎn)圖
常見的異常散點(diǎn)圖
疑似異常淋巴細(xì)胞增多(WDF通道)
在單核細(xì)胞散點(diǎn)圖(綠色)的上方出現(xiàn)異常均勻分布的呈長(zhǎng)橢圓形或近似長(zhǎng)方形的散點(diǎn)圖(圖中所圈位置),可能是由于病原體對(duì)淋巴細(xì)胞刺激下,核酸與染液結(jié)合加強(qiáng),側(cè)向熒光(SFL)染色強(qiáng)度增加,側(cè)向熒光(SFL)加強(qiáng),而出現(xiàn)在散點(diǎn)圖上方,需進(jìn)行血涂片復(fù)檢。
圖3. 疑似淋巴細(xì)胞增多(WDF通道)
疑似有核紅細(xì)胞增多(WNR檢測(cè)通道)
出現(xiàn)于嗜堿細(xì)胞散點(diǎn)圖(藍(lán)色)左上方,顆粒增多,區(qū)域擴(kuò)大(圖中所圈位置),需進(jìn)行血涂片復(fù)檢。
圖4. 疑似有核紅細(xì)胞增多(WNR檢測(cè)通道)
疑似嗜堿粒細(xì)胞增多(WNR通道)
出現(xiàn)于嗜堿細(xì)胞散點(diǎn)圖(藍(lán)色)右上方,顆粒增多,區(qū)域擴(kuò)大(圖中所圈位置),需進(jìn)行血涂片復(fù)檢。
圖5. 疑似嗜堿粒細(xì)胞增多(WNR通道)